紫外可見分光光度計(jì)的應(yīng)用--用多組分分析法對(duì)各組分定量
在一個(gè)波長(zhǎng)下，溶液的總吸光度等于每種成分的吸光度之和。基于此，可以分析混合物的各個(gè)組分。
如果有混合物，雖然是多組分，但組分吸收帶不重疊。一個(gè)成分在某個(gè)波長(zhǎng)有很大的吸收，而其他成分在這個(gè)波長(zhǎng)沒(méi)有吸收。這樣，上述標(biāo)準(zhǔn)曲線法就可以用于該波長(zhǎng)下該組分的定量測(cè)定。
如果是多組分混合物，雖然吸收帶相互重疊，但符合比爾定律，則可以采用不相交議程的方法進(jìn)行量化。如果混合物包含 n 個(gè)已知成分，則需要在 n 個(gè)合適的波長(zhǎng)下測(cè)量 n 個(gè)子成分在 n 個(gè)波長(zhǎng)下的摩爾吸收系數(shù)。在選擇波長(zhǎng)時(shí)，應(yīng)注意使一種成分的吸收系數(shù)大于其他成分的吸收系數(shù)，以獲得更高的精度。
如果混合物中幾種成分的吸收帶相互重疊，并且不符合比爾定律，則無(wú)法通過(guò)求解聯(lián)立方程進(jìn)行分析。此時(shí)，很難通過(guò)分光光度法進(jìn)行量化。 Fry 使用校準(zhǔn)方法將混合樣品中的五組分成不同的溶液，從而獲得一系列校準(zhǔn)曲線。在校準(zhǔn)曲線的基礎(chǔ)上，通過(guò)分析得到五種組分的含量。但該方法非常繁瑣，使用不方便。
如果混合物中含有未知吸收帶的成分，則難度更大。這時(shí)候最好先用化學(xué)分離提純。但也可以直接用分光光度法分析。使用雜質(zhì)存在時(shí)吸收光譜形狀的變化，計(jì)算混合物中含有雜質(zhì)時(shí)的魚肝油量。分光光度法雖然可用于多組分分析，但方法相對(duì)繁瑣。
近年來(lái)，許多分光光度計(jì)都配備了多組分分析附件。借助微處理器對(duì)混合物中多種成分的含量進(jìn)行分析和計(jì)算非常簡(jiǎn)單、快速和準(zhǔn)確。使分光光度法在混合定量分析中發(fā)揮更大的作用。同樣，后面介紹的導(dǎo)數(shù)光譜也可以用來(lái)量化。
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